上海通蔚生物闡述：RT-PCR試劑盒的儲(chǔ)存條件及保存方法

我們?cè)谧?u>RT-PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)，常會(huì)遇到度偏低的問題，可根據(jù)不同問題可能原因及其防止方法總結(jié)，僅供參考，如想了解更多可來函詳詢我司業(yè)務(wù)人員！

RT-PCR試劑盒先利用反轉(zhuǎn)錄酶M-MLVRTase將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,再以cDNA為模板利用biotekeTaq在同一反應(yīng)管內(nèi)連續(xù)進(jìn)行RealTimePCR擴(kuò)增反應(yīng)(使用SYBRGreenI嵌合熒光法)。本制品是采用SYBRGreenI嵌合熒光法進(jìn)行RealTimeOneStepRT-PCR反應(yīng)的專用試劑。

RT-PCR試劑盒方法以其快速性及定量性被廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域,使用本制品進(jìn)行RT-PCR試劑盒反應(yīng)可在同一反應(yīng)管內(nèi)連續(xù)進(jìn)行,操作簡(jiǎn)單,并能有效防止污染。本反應(yīng)體系由于可以對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè),大大提高了檢測(cè)靈敏度,并省略了PCR反應(yīng)后的電泳步驟,非常適合于RNA病毒等微量RNA的檢測(cè)。

RT-PCR試劑盒的儲(chǔ)存條件：
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
RT-PCR試劑盒特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)**種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中**的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

上海通蔚生物的RT-PCR試劑盒優(yōu)勢(shì)：將繁瑣的實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單化，提供實(shí)驗(yàn)所需的全套試劑和實(shí)驗(yàn)相關(guān)的反應(yīng)參數(shù)，為中學(xué)教學(xué)特點(diǎn)量身打造，整個(gè)反應(yīng)只需31分鐘，大大縮短了反應(yīng)時(shí)間。我們公司的試劑盒支持高中生物分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行質(zhì)粒模版的提取，提高學(xué)生的探索精神，便于學(xué)生對(duì)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)加深理解。