糖化酶(Glucoamylase)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100T/48S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
糖化酶,即葡萄糖淀粉酶(EC3.2.1.3),又稱(chēng)γ-淀粉酶,是一種外切型糖苷酶,它從淀粉的非還原性末端水解α-1,4糖苷鍵和α-1,6糖苷鍵,將淀粉完全水解為葡萄糖,因此廣泛的應(yīng)用于酒精、白酒、氨基酸、有機(jī)酸,甘油,淀粉糖等工業(yè)中,是我國(guó)重要的工業(yè)酶制劑之一。
測(cè)定原理:
糖化酶水解可溶性淀粉生成葡萄糖,與3,5-二硝基水楊酸生成紅棕色化合物,在540nm處有 光吸收,在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液顏色深淺與葡萄糖的量成正比,可測(cè)定計(jì)算得糖化酶的活力。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
酶液提取:
1.?組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g,加入 1mL 提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測(cè)。
2.?細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min);然后 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3.?培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測(cè)。
